支原體DNA抽提Kit特點及操作步驟  

特點  

1.符合歐洲藥典的要求。  

2.從細(xì)胞上清和生物制品中，均可分離支原體DNA，全程只需30分鐘。  

3.洗脫DNA純度高，體積50μl，保證PCR最大的靈敏。  

細(xì)胞被支原體污染后的表現(xiàn)  

①細(xì)胞生長緩慢  

②細(xì)胞變形  

③培養(yǎng)基中碎片增加  

④細(xì)胞易聚團(tuán)  

⑤鏡下觀察有小黑點  

⑥培養(yǎng)基提前變色  

操作步驟  

試劑盒組分  

Spin columns（核酸純化住）、Collection tubes（收集管）、Conditioner液、Binding Buffer E液、Buffer A1液、Buffer A2液、Buffer E液

該試劑盒的設(shè)計滿足歐洲藥典和日本藥典對于不同類型樣本（如軟骨細(xì)胞、血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清）在DNA抽提后的檢測標(biāo)準(zhǔn)。可直接檢測細(xì)胞上清（研究領(lǐng)域），或者先對細(xì)胞培養(yǎng)物富集，或先抽提DNA。該試劑盒完全符合EP2.6.7和JP G3的要求。

檢測原理：

該試劑盒擴(kuò)增柔膜體對應(yīng)的16S rRNA上的特異序列， 而真核細(xì)胞和其他細(xì)菌DNA不會被擴(kuò)增。

試劑盒說明書同時包括細(xì)胞培養(yǎng)上清篩查和遵循歐洲藥典和日本藥典檢查的流程，包括對DNA抽提和對樣本體積的規(guī)定。整個檢測小于3小時。并且與ELISA、熒光染色和培養(yǎng)法不同的是，無須活支原體。和一些生化和細(xì)胞學(xué)方法相比，PCR具有更高的靈敏度和準(zhǔn)確性。