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關(guān)于維生素測定培養(yǎng)基的這些問題,您肯定也遇到過

更新時間:2021-08-11  |  點擊率:1113
   維生素測定培養(yǎng)基是利用萊士曼氏乳酸桿菌對維生素的特異性和靈敏性,定量測定出試樣中維生素的含量。在測定用培養(yǎng)基中供給除維生素以外的所有營養(yǎng)成分,這樣萊士曼乳桿菌生長濃度(吸光度)就會同標準曲線工作液及未知待測溶液中維生素的含量呈正比的線性關(guān)系。以不同濃度標準溶液的維生素含量為橫軸,以萊士曼乳桿菌生長濃度(吸光度)為縱軸,即可繪制標準曲線,根據(jù)標準曲線即可計算出試樣中維生素的含量。
  維生素測定培養(yǎng)基的常見問題回答:
  1.該測定培養(yǎng)基能用肉眼判斷其pH值嗎?
  答:該測定培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通培養(yǎng)基中的酚紅含量不同,不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗來判定pH值,建議使用pH計進行測定。
  2.什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
  答:酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。酚紅本身對生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生影響,可以通過純化技術(shù)去除,但酚紅在無血清培養(yǎng)基可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡,影響細胞生長,當(dāng)然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分,很多國外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過程中都使用無酚紅培養(yǎng)基。
  3.谷氨酰胺溶液和碳酸氫鈉的配制方法是什么?
  答:以0.2mol/L的L-谷氨酰胺配制為例:稱取L-谷氨酰胺2.92g,加注射用水100ml,充分攪拌混勻。用0.2μm濾膜正壓過濾除菌。溶液應(yīng)在4℃下避光保存,2周內(nèi)使用。
  以7.5%NaHCO3的配制為例:稱取NaHCO37.5g溶于100ml蒸餾水中過濾除菌。
  4.維生素測定培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)是什么?
  答:平衡鹽一般是由無機鹽及葡萄糖組成的。平衡鹽有Hanks′系統(tǒng)、Earle′s系統(tǒng)、Dulbecco′s磷酸緩沖鹽系統(tǒng)等。
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